HFSF人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GLC-82細(xì)胞，人肺腺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細(xì)胞,ZA6細(xì)胞 CL-0050Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG 羊抗雞IgG 1mg

FYCO1： 鋅指蛋白FYCO1抗體 NRXN3 Others Human 人 Neurexin-3-beta / NRXN3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒 IgG 兔抗雞IgG 1mg

FYTTD1： FYTTD1蛋白抗體 人腦血管平滑肌細(xì)胞 Human

HCAEC-c 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 chicken IgY 小鼠抗雞IgY抗體 CM-M003小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Phospho-Mre11 (Ser676)： 0酸化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體 STAT4 Others Human 人 STAT4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 (LDH) 大鼠乳酸脫氫酶 96T

MST1： 蛋白激酶MST抗體 DU145細(xì)胞，前列腺癌細(xì)胞 涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞,Acc-3細(xì)胞 人整合SV40基因的上皮細(xì)胞;HBL-100 [HBL100]

IFNG Others Rat 大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)ELISA試劑盒 sCD38(Human Soluble Cluster of differentiation 38)  人可溶性CD38 96T

Phospho-Mst1(Thr183) + Mst2(Thr180)： 0酸化蛋白激酶MST抗體 人皮膚成纖維細(xì)胞;HSAS4

HFSF人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞HMGA1： 高遷移率族蛋白A1抗體 KIT Others Human 人 KIT / c-KIT / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

狗骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells 人肌酸激酶(CK)ELISA 試劑盒 CD40L(CD40 Ligand/TNFSF5/CD154) CD40L抗原 0.5mg

Phospho-HER2 (Thr686)： 0酸化HER2受體抗體 小鼠髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC 白血病細(xì)胞，RBL-2H3細(xì)胞 ME細(xì)胞，C57小鼠黑色素瘤瘤株

PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人肌球蛋白重鏈(MHC)ELISA 試劑盒 CD44 CD44抗原 (多肽抗原) 0.5mg

HSP20： 熱休克蛋白-20抗體 CL-0234TM3(小鼠間質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。