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單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒

型 號

產(chǎn)品時間2024-11-22

所屬分類PCR檢測試劑盒

報價

產(chǎn)品描述:單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品概述

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Listeria monocytogenesPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
芴甲氧羰基-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Na-芴甲氧羰酰基-S-(乙酰基-氨甲基)-L-半胱氨酸/FMOC-S-乙酰氨甲基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(Acm)-OH特純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,86060-81-32~8°C

芴甲氧羰基-N-三苯甲基-L-組氨酸/N-Fmoc-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Nα-FMOC-N(IM)-TRITYL-L-組氨酸/N-芴甲氧羰基-N'-三苯甲基-L-組氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-N'-三苯甲基-L-組氨酸/Fmoc-His(Trt)-OH特純,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,109425-51-62~8°C

芴甲氧羰酰基-N-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N'-甲基-L-纈氨酸/Fmoc-N-Me-Val-OH特純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84000-11-32~8°C

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-酪氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-酪氨酸/Fmoc-Tyr(tBu)-OH特純,98.5%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,71989-38-32~8°C

芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-叔丁基-L-蘇氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-O-叔丁基-L-蘇氨酸/Fmoc-Thr(tBu)-OH特純,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,71989-35-02~8°C

馬尿酰-組氨酰-亮氨酸/N-Hippuryl-His-Leu hydrateBR,98%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,207386-83-2保存:-20℃

O-乙酰-L-絲氨酸鹽酸鹽/O-乙酰-L-氫氯化絲氨酸/O-Acetyl-L-serine hydrochlorideBR,98%10毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,66638-22-0保存:-20℃

N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N'-琥珀酰亞胺基碳酸酯/N,N-琥珀酰氨基碳酸酯/N,N'-碳酸二琥珀酰亞胺基/N-氫氧化琥珀酰亞胺/DSC高純,98.5%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,74124-79-1RT

氨基酸螯合鐵/10% Iron chelate高純50克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,RT

DL-高半胱氨酸/DL-2-氨基-4-巰基丁酸/DL-類半胱氨酸/DL-巰基丁氨酸/DL-同型半胱氨酸/同型半胱氨酸/升半胱胺酸/2-氨基-4-巰基丁酸/DL-HomocysteineBR,95%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,454-29-5保存:-20℃

Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精氨酸/Fmoc-Pbf-精氨酸/N-芴甲氧羰?;?2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺酰-L-精氨酸/Fmoc-保護基精氨酸/芴甲氧羰酰-精氨酸/FMOC-NOMEGA-2,2,4,6,7-五甲基苯并呋喃-5-磺?;?L-精氨酸/Fmoc-Arg(Pbf)-OHBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,154445-77-9保存:-20℃

FMOC-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-L-谷氨酸5-叔丁酯/芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-O-叔丁基-L-谷氨酸/Fmoc-Glu(OtBu)-OHBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,71989-18-92~8°C

FMOC-S-叔丁基-L-半胱氨酸/FMOC-硫代叔丁基-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-S-叔丁基-L-半胱氨酸/N-(9-芴甲氧羰基)-硫代叔丁基-L-半胱氨酸/Fmoc-Cys(tBu)-OHBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,67436-13-92~8°C

甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽/鹽酸甘氨酸叔丁酯/氨基乙酸叔四丁酯鹽酸鹽/甘氨酸叔丁基酯鹽酸鹽/Glycine tert butyl ester hydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,27532-96-3RT
單核細胞增生李斯特菌PCR檢測試劑盒SOB培養(yǎng)基粉劑,1LD-2-Aminobutyric acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

SOB培養(yǎng)基(pH7.0),500mlNA 質(zhì)量規(guī)格:>98%

SOC培養(yǎng)基粉劑,1LN-(tert-Butoxycarbonyl)-(S)-(+)-3-pyrrolidinol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SOC培養(yǎng)基(pH7.0),500mlAcetoacetanilide 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR

SB固體培養(yǎng)基粉劑(Super Broth),1L5-[(1E)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SOB固體培養(yǎng)基粉劑,1L2-Amino-4-cyanopyridine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源馬心

SOC固體培養(yǎng)基粉劑,1L5(6)-Aminofluorescein 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源心

TB固體培養(yǎng)基粉劑(Terrific Broth),1LN-(2-Hydroxyethyl)ethylenediaminetriacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,來源豬心
注意事項:
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。

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